Pepwerk · Zugangsprüfung
Pepwerk vertreibt ausschließlich Research-Grade Peptide für den Einsatz in autorisierten Laborumgebungen. Der Zugang ist auf volljährige Personen beschränkt die im Rahmen einer wissenschaftlichen Institution handeln.
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Analytik
High Performance Liquid Chromatography ist die Standardmethode zur Reinheitsmessung von synthetischen Peptiden. Was die Methode misst, wie sie funktioniert und was die Ergebnisse im CoA bedeuten.
HPLC steht für High Performance Liquid Chromatography — Hochleistungsflüssigkeitschromatographie. Es handelt sich um eine analytische Trennmethode bei der ein flüssiges Probengemisch unter hohem Druck durch eine Trennsäule gepumpt wird. Die verschiedenen Komponenten der Probe wandern unterschiedlich schnell durch die Säule und werden so voneinander getrennt.
Im Kontext von Research-Peptiden wird HPLC-UV eingesetzt — das bedeutet, die getrennten Komponenten werden per UV-Detektion gemessen. Peptide absorbieren UV-Licht bei einer Wellenlänge von typischerweise 214 nm oder 220 nm, was eine präzise quantitative Bestimmung ermöglicht.
Die Probe wird in ein Lösungsmittel aufgelöst und in die HPLC-Anlage injiziert. Eine Pumpe treibt das Lösungsmittelgemisch (die „mobile Phase“) unter Druck durch die Trennsäule (die „stationäre Phase“). Verschiedene Moleküle interagieren unterschiedlich stark mit der stationären Phase — dadurch verlassen sie die Säule zu unterschiedlichen Zeitpunkten.
Der Detektor misst kontinuierlich die UV-Absorption des aus der Säule austretenden Eluats. Das Ergebnis ist ein Chromatogramm — eine grafische Darstellung der Absorption über die Zeit. Jeder Peak im Chromatogramm entspricht einer Verbindung in der Probe.
Wichtig
Der Reinheitswert im CoA ergibt sich aus dem Verhältnis der Peakfläche der Zielverbindung zur Gesamtpeakfläche aller Peaks im Chromatogramm. Ein Wert von 98% bedeutet: 98% der detektierten Substanzmenge entfallen auf das gewünschte Peptid.
HPLC-UV misst die Reinheit — also den relativen Anteil der Zielverbindung. Die Massenspektrometrie (MS) ergänzt dies durch die Identitätsbestätigung: Sie misst das Molekulargewicht der Verbindung und bestätigt damit, dass es sich tatsächlich um das gewünschte Peptid handelt.
Ein vollständiger CoA für Research-Peptide enthält idealerweise beide Methoden — HPLC-UV für den Reinheitswert und MS für die Sequenz- und Identitätsbestätigung.
Ein HPLC-Reinheitswert von ≥98% ist der anerkannte Standard für Research-Grade Peptide. Er bedeutet dass mindestens 98% der gemessenen Substanz auf das Zielpeptid entfallen. Die verbleibenden ≤2% können aus Synthesenebenprodukten, Reagens-Rückständen oder anderen Verunreinigungen bestehen.
Für die meisten präklinischen Forschungsanwendungen in Zellkultur- und Tiermodellen gilt ≥98% als ausreichend für reproduzierbare Ergebnisse. Für hochsensitive Assays kann eine höhere Reinheit erforderlich sein.
Hinweis
Dieser Artikel dient ausschließlich der wissenschaftlichen Information. Er stellt keine medizinische Beratung dar. Alle genannten Produkte sind ausschließlich für Forschungszwecke in autorisierten Laborumgebungen bestimmt.